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脓毒症动物模型构建方法总结

脓毒症：

是一种严重的全身性炎症反应综合征，是由感染引起的机体免疫系统过度激活和炎症反应失控的疾病。免疫系统反应过于激烈，导致炎症反应泛滥，从而引发全身性炎症反应综合征。

常见脓毒症造模方法：

1.细菌感染：通过注射细菌或其产生的细菌毒素来诱导脓毒症模型。常用的细菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。

2.LPS诱导：脂多糖（LPS）是细菌外膜中的主要成分，具有强烈的免疫激活作用。可以通过注射LPS来诱导炎症反应和脓毒症模型。常用的给药途径包括静脉注射、腹腔注射或气道暴露。

3.盲肠结扎穿刺（CLP）：腹膜炎攻击方法的一种，主要是通过手术方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成感染，从而构建脓毒症模型。

造模方法步骤

一、.盲肠结扎穿刺法（CLP）：

  1.实验开始前禁食不禁水12h，小鼠腹腔注射戊巴比妥钠，待小鼠完全麻醉后仰卧位固定。

  2.对腹部喷酒精和碘伏消毒，去除腹部表面毛发，使用手术刀在腹壁切2cm切口，暴露盲肠，在回盲瓣远端结扎盲肠，然后用针刺穿刺盲肠2次，轻轻挤压盲肠，使少量的肠内容物渗出，将盲肠复位，缝合腹膜和皮肤。

  3.小鼠正常饲养6h后皮下注射30ml/kg生理盐水和30mg/kg的头孢曲松。

二、LPS诱导法 :

  1.大鼠用卵圆镊夹住其颈背部皮肤令其悬空，下腹部消毒。

  2.缓慢腹腔注射内毒素（大肠杆菌脂多糖，LPS，8-10 mg/kg，即230-250g的大鼠，每只注射2-2.5mg，约存活5-7天）制成大鼠脓毒症模型。

  3.造模后大鼠出现精神倦怠，躁动，呼吸、心率加快，腹胀，口鼻腔分泌物增多，竖毛，直肠温度变化超过1℃等表现则视为造模成功。

结果案例

HE染色镜下可见control组肠绒毛形态结构完整，未见出血

LPS组肠黏膜固有层下出血严重，可见炎细胞浸润

IL-9组肠黏膜固有层下出血严重，肌层可见炎细胞浸润