药效学实验中心

通便功能动物实验评价方法

1 实验项目

1.1小肠运动实验

1.1.1实验原理：

经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠小肠蠕动抑制模型，计算一定时间内小肠的墨汁推进率，来判断模型小鼠胃肠蠕动功能。

1.1.2实验方法

选用成年健康雄性小鼠，体重在18-22g，每组10-15只。实验设三个剂量组，一个阴性对照组，一个模型对照组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照组同样途径给溶剂。受试样品连续给予时间7天，各组小鼠禁食不禁水 20小时。模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯5-6mg/kg BW，阴性对照组给蒸馏水。给复方地芬诺酯或洛哌丁胺0.5小时后，剂量组灌胃给予含相应浓度受试样品的墨汁，阴性和模型对照组给墨汁灌胃。25分钟后立即脱颈椎处死动物，打开肠腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。

1.2排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定

1.2.1原理：

经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠便秘模型，测定小鼠首粒排黑便排便时间、5或6小时内排便粒数和排便重量，来反映模型小鼠的排便情况。

1.2.2实验方法

选用成年健康雄性小鼠，体重在18-22g，每组10-15只。实验设三个剂量组，一个阴性对照组和一个模型对照组，必要时设阳性对照组。空白对照组和模型对照组同样途径给溶剂。受试样品连续给予时间7天，各组小鼠禁食不禁水 20小时。阴性对照组给蒸馏水，模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯10-12mg/kg BW。给复方地芬诺酯0.5小时后，阴性对照组和模型对照组小鼠用墨汁灌胃，剂量组灌胃给予含相应浓度受试样品的墨汁，动物单笼饲养，正常饮水进食。从灌墨汁开始，记录每只动物首粒排黑便时间、5或6小时内排便粒数及重量。

2 实验原则

2.1 动物实验和人体试食实验所列指标均为必做项目。

2.2 实验中复方地芬诺酯或洛哌丁胺的造模剂量应通过预实验确定。

2.3 除对便秘模型动物各项必测指标进行观察外，还应对正常动物进行观察，不得引起动物明显腹泻。

2.4 排便实验中模型成立的条件为排首粒黑便时间、5或6小时内排粪便重量和粪便粒数与阴性对照组差异均有显著性。

2.5排便次数的观察时间实验前后应保持一致。

3 动物实验结果判定

五到六小时内排粪便重量和粪便粒数任一项结果阳性，同时小肠运动实验和排便时间任一项结果阳性，可判定该受试样品通便功能动物实验结果阳性。