药效学实验中心

辅助降血脂功能评价方法

1 实验项目

1.1 混合型高脂血症动物模型

1.1.1 原理：用含胆固醇、蔗糖、猪油、胆酸钠的饲料喂养动物，可形成脂代谢紊乱动物模型，然后给予动物试验样品，可检测试验样品对高脂血症的影响，并可确定脂质的吸收，脂蛋白的形成，以及测试样品或排泄物对脂质的降解。

1.1.2 试验方法：SPF级SD雄性大鼠，体重180～220g，每组8～12只。在屏障系统下，给大鼠喂食维持性饲料5-7天。根据体重随机分为2组，10只大鼠给予维持饲料作为空白对照组，40只大鼠给予模型饲料作为模型对照组。每周称一次体重。模型对照组给予模型饲料1～2周后，空白对照组和模型对照组大鼠不禁食采血，采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量。根据TC水平，模型对照组随机分为4组。分组后空白对照组与模型对照组的TC、TG、LDL-C、HDL-C差异无统计学意义。分组后，三个剂量组每天口服试验样品，空白对照组和模型对照组同时给予等体积的相应溶剂，空白对照组继续给予维持饲料，继续给模型对照组和三个剂量组喂模型饲料，定期称体重。在实验结束时，在不禁食的情况下采集血液。采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。

1.2 高胆固醇血症动物模型

1.2.1 原理：用含有胆固醇、猪油和胆酸钠的饲料喂养动物，可以形成高胆固醇血症和脂代谢紊乱的动物模型，然后给动物一个试验样品，可以检测试验样品对高胆固醇血症的影响，并可以确定测试样品对脂质吸收、脂蛋白形成、脂质降解或排泄的影响。

1.2.2 动物试验方法：SPF级SD雄性大鼠，体重180-220g，每组8-12只仅有的。在屏障系统下，给大鼠喂食维持性饲料5-7天。根据体重随机分为2组，10只大鼠给予维持饲料作为空白对照组，40只大鼠给予模型饲料作为模型对照组。模型对照组给予模型饲料后1-2周，空白对照组和模型对照组动物不禁食采血，采血后尽快分离血清，检测测定血清TC、TG、LDL-C和HDL-C。模型对照组按TC水平随机分为4组。分组后空白对照组与模型对照组的TC、TG、LDL-C、HDL-C比较差异无统计学意义（P>0.05）。分组后，三个剂量组每天口服试验样品，空白对照组和模型对照组同时给予等体积的相应溶剂，空白对照组继续给予维持饲料，模型对照组和三个剂量组继续给予模型。采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。

2 实验原理

2.1 动物实验和人体食品试验所列指标均为强制性项目。

2.2 根据供试品的作用机制，可选择两种动物模型中的一种进行动物实验。

2.3 根据测试样品的作用机理，可选择人体食品测试的三种方案之一。

2.4 进行人体食品试验时，应进一步观察被测样品的食用安全性。

3 结果判断

3.1 动物实验：

3.1.1 混合型高脂血症动物模型

辅助降血脂功能结果判断：模型对照组与空白对照组比较，血清甘油三酯升高，血清总胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇升高，差异有显着性意义，建立判断模型。 (1)各剂量组与模型对照组比较，各剂量组血清总胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇均降低，血清甘油三酯降低，差异均有统计学意义。密度脂蛋白胆固醇不明显低于模型对照组，可以确定供试品有助于降低具有降血脂功能的动物实验结果为阳性。 (2)各剂量组与模型对照组相比，各剂量组血清总胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇均降低，差异有统计学意义。同时，各剂量组血清甘油三酯均不显着高于模型对照组。给药组血清高密度脂蛋白胆固醇与模型对照组相比无显着降低，在具有辅助降低血清胆固醇作用的动物实验中，可判断供试样品为阳性。 (3)各剂量组与模型对照组比较，各剂量组血清甘油三酯均降低，差异有统计学意义。高密度脂蛋白胆固醇与模型对照组相比没有明显降低，可以确定供试品在辅助降低血清甘油三酯功能的动物实验中具有阳性结果。

3.1.2 高胆固醇血症动物模型

模型对照组与空白对照组比较，血清总胆固醇（TC）或低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）升高，血清甘油三酯（TG）差异不显着，建立判断模型。各剂量组与模型对照组比较，各剂量组血清总胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇均降低，且差异有显着性，各剂量组血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）并没有显着低于模型控制。组，血清甘油三酯未显着高于模型对照组，可以确定供试品辅助降低血清胆固醇功能的动物实验结果为阳性。